Caracteres mínimos para la identificación de Listeria Monocytogenes "sensu stricto" / Minimum characters for the identification of Listeria Monocytogenes \"sensu stricto\"

Se seleccionó el mínimo número de ensayos necesarios para la caracterización de microorganismos pertenecientes al género Listeria. Con el propósito de establecer el grado de correlación o independencia de esos caracteres se aplicó la Técnica R, método numérico de agrupamiento. Esta técnica permite deducir el origen, valor selectivo y patrones de variación de los mismos. Se estudiaron 10 cepas de referencia pertenecientes a las diferentes especies propuestas para integrar el género Listeria, empleando 76 caracteres diferenciales. El código de los estados de los caracteres se hace asignando igual peso a todos ellos. La matriz básica de datos considera a los caracteres como OTUs (Unidades Taxonómicas Operacionales). Los caracteres son agrupados a partir de la matriz de distancia, obtenida por aplicación del coeficiente de Manhattan Distance. Se empleó el método de los pares no pesados usando promedios aritméticos (U.P.G.M.A.). La proximidad en el espacio delimitado por los componentes establece la relación entre los caracteres: cuanto más relacionados están, más cercanos se ubican. Los ensayos seleccionados permiten una correcta identificación de las diferentes especies propuestas para el género Listeria. Para la caracterización de estos microorganismos, a partir de una muestra de la cual se aíslen Bacilos regulares Gram positivos no formadores de esporos, morfológicamente compatibles con Listeria, deben realizarse como mínimo las siguientes pruebas: catalasa, hipurato, esculina, rojo de metilo, Voges Proskawer y arginina dehidrolasa. La Técnica-R permitió seleccionar el mínimo número de ensayos para la caracterización de las diferentes especies propuestas actualmente para el género Listeria. Ellos son: producción ácido/gas a partir de: adonitol, dulcitol, ramnosa, xilosa, sacarosa y alfa-metil-D-manósido, beta-hemólisis en sangre de conejo, equina y ovina (método convencional y del calor-frío), hemólisis en medio líquido (con y sin activación con 2-mercaptoetanol)

Aportes a la identificación de Listeria monocytogenes con fines clínico-epidemiológicos / Listeria monocytogenes identification with clinical and epidemiological objectives

La integración del género Listeria parece haberce resuelto con la inclusión de las especies Listeria monocytogenes (sensu stricto), L. Ivanovii (ex bulgárica), Linnocua, L. Welshimeri y L. Seeligeri. Se presenta una batería de resultados comparativos de varias cepas autóctonas y de colección, incluyendo las recientemente incorporadas al género. Se describe el hallazgo de dos nuevas especies moleculares de peso molecular 8.000 y 15.000 D, respectivamente con actividad hemolítica en L. monocytogenes y se analiza la importancia del estudio de actividad hemolítica en la identificación rápida de especies del género. Se enfatiza la necesidad de usar comparativamente hematíes de carnero y conejo, combinando la detección en medio gelificado y líquido, con o sin activación con 2 mercaptoetanol. Se reitera la importancia del estudio de ácidos grasos que en el caso de L. monocytogenes permite, por su riqueza en moléculas de C 15:Or y 17:Or, distinguirla fácilmente de otros géneros con fenotipos similares. Se analiza la crítica aplicación de serotipificación

Hemolisinas de Listeria monocytogenes demostrables por activación con 2- mercaptoctanol / Demonstrable Listeria monocytogenes hemolysins by 2- mercaptocthanol activation

Jones y Seeliger, con el apoyo del Comité Internacional sobre Bacteriología Sistemática, Subcomité sobre Taxonomía de Listeria, han propuesto la necesidad de reemplazar la cepa de L. monocytogenes ATCC 15313 como prototipo en virtud de su incapacida de inducir hemólisis en medios gelificados que contienen 5 o 10% de hematíes de origen ovino o equino (método clásico). En este trabajo se demuestra que, si bien, la cepa ATCC 15313 no induce hemólisis en las condiciones anteriores es capaz de hemolizar hematíes de carnero cuando los sobrenadantes de cultivos en infusión cerebro corazón adicionado de 0,5% de glucosa son previamente activados con 2-mercaptoetanol, condición que resulta general para todas las cepas de L. monocytogenes ensayadas. Igualmente la cepa ATCC 15313 induce lisis en medio gelificado de agar base sangre con hematíes de carnero cuando es cultivada en microaerofilia. Se estudiarion 13 cepas caracterizadas originalmente com L. monocytogenes. Se demuestra que la presencia de hemolisinas por el método directo y/o detección por activación con 2-mercaptoetanol es compatible con la identificación como L. monocytogenes, por lo cual se recomienda la inclusión de estaspruebas en todo estudio identificatorio. Además el estudio de capacidad hemolítica no puede obviar la prueba en microaerofilia. La ausencia de capacidad hemolítica en todas estas condiciones de ensayo es un factor de importancia para cuestionar la identificación de una cepa como L. monocytogenes